عنوان :
بررسی اثرات ضدسرطانی زهرمارکبری ایرانی بررویرده های سلولی سرطانی پستان درشرایطin vitroوin vivo
فهرست مطالب
1-1-3 اجزاء تشکیل دهنده زهر. 3
1-1-3-2پروتئینهای غیرآنزیمی: 3
1-1-3-3پتیدهای آنتی میکروبیال. 4
1-3 اهمیت موضوع تحقیق و انگیزه انتخاب آن. 6
1-4سوالات وفرضیه های تحقیق. 10
1-6 تعاریف متغیرها و واژه هاي كليدي.. 10
1-7-3 تعیین خلوص وغلظت به روش SDS-PAGE و برادفورد: 11
1-7-4بررسی سیتوتوکسیسیته هر یک از فراکشنهای جدا شده بر روی رده سلولی.. 12
1-7-5ایجاد موش توموری و تزریق فراکشنها 12
1-9 محدودیت و مشکلات تحقیق. 12
فصل سوم: روش شناسایی تحقیق.. 18
3-1 مواد و وسایل مورد نیاز. 19
3-2 محلول ها ومحیط کشت مورد استفاده: 19
3-3تجهيزات و امكانات آزمايشگاه كشت سلولي.. 21
3-3-1تهیه محلول آمونیوم استات 20 میلی مولار. 22
3-3-3 نحوه ساخت ژل الکتروفورز: 22
3-4-3 فراکشنه کردن زهر خالص.... 23
3-4-5 تعیین غلظت فراکشنه های به دست امده از دستگاه FPLC با روش برافورد. 23
3-4-6 تعیین وزن مولکولی پروتئین ونوم(SDS-PAGE) 23
3-4-6 بررسی سیتوتوکسیسیته هر یک از فراکشنهای جدا شده بر روی رده سلولی.. 24
3-4-6-1رنگ آمیزی تریپان بلو: 26
3-4-8 ایجادموش توموری وتزریق فراکشنها 29
فصل چهارم: تجزیه وتحلیل یافته های تحقیق.. 30
4-1 نتایج مربوط به فراکشنه کردن سم خالص مارکبری: 31
4-2 نتایج حاصل از فراکشن های حاصل از سم مارکبری: SDS-PAGE.. 31
4-3 کشت رده های سلول سرطانی MDA-MB435 و 4T1. 32
4-4 تعیین غلظت سم مار خالص فراکشنه شده به وسیله روش برادفورد: 33
4-5کشت تمامی فراکشن ها بر روی رده ی سلولی 4T1. 34
4-6 کشت فراکشن های تخلیص شده بر روی رده ی MDA-MB435. 38
4-7 نتایج مربوط به شرایط in vivo. 42
فصل پنجم: نتیجه گیری وپیشنهادات.. 43
5-2 نتایج حاصل از آزمایش In vivo. 45
فهرست جداول
جدول (3-1 )ترکیبات مورد نیاز برای ساخت ژل Resolving 12% برای حجم 10ml : 22
جدول (3-2 ) :ترکیبات مورد نیاز برای ساخت ژل Stacking برای حجم 2ml: 22
جدول (4-2) IC50مربوط به MTT 4T1. 41
جدول (4-3)IC50مربوط بهMTT MDA-MB435. 41